目前CDK4/6抑制剂已获批用于治疗HR+/HER2-晚期乳腺癌，但尚未明确在HER2阳性（HER2+）乳腺癌人群的疗效。这项研究通过评估HER2+乳腺癌pRb的水平来分析HER2状态对CDK4/6活性的影响。研究结果表明，HER2+的pRb明显高于HER2-（P=0.001）。在HER2+病例中，HER2拷贝数与pRb水平存在正相关，但无统计学意义。HER2+使用CDK4/6抑制剂治疗时可能有所缓解，pRb可作为预测的生物标志物。
编者按：目前CDK4/6抑制剂已获批用于治疗HR+/HER2-晚期乳腺癌，但尚未明确在HER2阳性（HER2+）乳腺癌人群的疗效。这项研究通过评估HER2+乳腺癌pRb的水平来分析HER2状态对CDK4/6活性的影响。研究结果表明，HER2+的pRb明显高于HER2-（P=0.001）。在HER2+病例中，HER2拷贝数与pRb水平存在正相关，但无统计学意义。HER2+使用CDK4/6抑制剂治疗时可能有所缓解，pRb可作为预测的生物标志物。
研究背景
随着科技发展，细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）抑制剂的发现为临床医生提供了新的治疗选择，尤其是雌激素受体阳性、人表皮生长因子受体2阴性（ER+/HER2-）乳腺癌[1]。细胞周期蛋白和CDK是细胞周期和细胞分裂所需的重要成分，细胞周期蛋白D-CDK4/6-Rb通路在G1转变为S期的过程中至关重要。细胞周期蛋白D1可通过不同的信号通路来响应各种外部刺激；然后与CDK4/6形成复合物，导致蛋白激酶激活并继续单磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白（Rb），使Rb介导的E2F转录因子抑制降低，从而使细胞周期蛋白E表达。Rb蛋白随后通过细胞周期蛋白E和CDK2的作用过度磷酸化，改变构象以抑制E2F转录因子的结合，然后释放E2F转录因子并启动多种下游功能，包括细胞进入S期。
大约70%-75%的乳腺癌病例为ER+[2]。雌激素的作用之一是通过细胞周期蛋白D1-CDK4/6-Rb通路调节细胞周期[3]，通过雌激素受体α（ERα）可增加细胞周期蛋白D1的表达。细胞周期蛋白D1也可直接结合ERα并诱导ER介导的转录[4]。细胞周期蛋白D1-CDK4/6-pRb通路的失调在乳腺癌的发生和发展中起着重要作用。因此，首先在ER+乳腺癌患者中研究了CDK4/6抑制剂的疗效[5]。
当细胞周期蛋白D与CDK4/6结合时，Rb被磷酸化。磷酸化Rb（pRb）的存在可能代表完整的细胞周期蛋白D-CDK4/6-Rb通路，而CDK4/6抑制剂可以靶向该通路。Rb上的Ser807/811位点是CDK4的主要磷酸化位点之一[6]。因此本研究评估了HER2+乳腺癌中的pRb（Ser807/811）水平，以确定HER2状态是否对CDK4/6活性有影响，这可为CDK4/6抑制剂在HER2+乳腺癌中的疗效提供数据。
研究结果
样本特征
纳入130例浸润性乳腺癌，其中ER-/PR-/HER2+38例（包括浸润性导管癌36例，浸润性小叶癌2例）；ER+/PR±/HER2+39例（包括浸润性导管癌35例，浸润性小叶癌3例，浸润性导管和小叶混合癌1例）；ER-/PR-/HER2-53例（包括浸润性导管癌46例，浸润性小叶癌1例，多形性小叶癌2例，化生性浸润性癌1例，低分化癌3例）。
△pRb的H&E染色和免疫组化染色的代表性病例
HER2+导致pRb水平显著升高
pRb的染色在不同样品中不同，无论是强度还是百分比。总体而言，pRb H分数范围为3-270。将H分数划分为低（1-100）、中（101-200）和高（201-300）3类时，ER-/PR-/HER2+在3类中的比例分别为52.6%、31.6%、15.8%；ER+/PR±/HER2+的比例分别为56.4%、38.5%、5.1%；ER-/PR-/HER2-的比例分别为79.2%、15.1%、5.7%。相比之下，HER2+人群（包括ER-/PR-/HER2+和ER+/PR±/HER2+）的平均H评分显著高于HER2-人群（P=0.001）。此外，当ER-/PR-/HER2+和ER+/PR±/HER2+分别与ER-/PR-/HER2-进行比较时，两组均显著高于后者（P=0.001，P=0.03）。
△ER-/PR-/HER2+、ER+/PR±/HER2+和ER-/PR-/HER2-中的pRb H平均分数
HER2基因拷贝数与pRb水平呈弱正相关
对于HER2+病例，每个细胞的HER2基因拷贝数范围为3.9-37.5。ER-/PR-/HER2+亚组的平均基因拷贝数为20.04±8.54，ER+/PR±/HER2+亚组为13.96±7.67。相比之下，ER+/PR±/HER2+亚组的HER2基因拷贝数明显低于ER-/PR-/HER2+亚组（P=0.001）。分析所有HER2+病例表明，HER2基因拷贝数与pRb H评分之间呈正相关，但无统计学意义（r=0.192，95%CI，[-0.033，0.399]，P=0.09）。
△HER2+病例中HER2基因拷贝数与pRb H分数之间的关系
研究讨论
临床前证据已将细胞周期蛋白D1确定为HER2-neu诱导恶性转化的关键下游靶标[7]。本项研究发现，与HER2-病例相比，HER2+病例通常具有更高的pRb水平，与临床前结果一致；表明HER2+乳腺癌中的CDK4/6激酶活性更高，使用CDK4/6抑制剂治疗可能有效。
研究发现，HER2基因拷贝数和pRb水平呈正相关；表明HER2基因拷贝数可反映CDK4/6活性（即基因拷贝数越高，CDK4/6活性越强）。如果CDK4/6抑制剂被批准用于HER2+乳腺癌治疗，则可能需要根据HER2基因拷贝数确定药物剂量。在HER2+病例中，ER+的HER2基因拷贝数通常低于ER-，与其他研究一致[8]，但ER+/PR±/HER2+和ER-/PR-/HER2+组之间的pRb水平没有显著差异。在模型中，CDK4/6抑制剂联合抗HER2治疗比单一药物更能抑制肿瘤生长[9]，表明HER2靶向治疗和CDK4/6抑制剂的潜在协同作用。
Rb是CDK4/6抑制剂作用的核心。多项研究对Rb的表达、Rb1基因的改变以及Rb磷酸化进行了研究。最近的一项研究表明，获得性Rb1突变与转移性HR+乳腺癌患者对CDK4/6抑制剂的获得性耐药有关[10]。本研究表明，pRb水平与HER2基因拷贝数呈弱正相关，需要进一步的研究来确定其生物标志物的价值。在本研究中，5.7%（53例中的3例）的ER-/PR-/HER2-乳腺癌患者存在高水平的pRb，表明细胞周期蛋白D1-CDK4/6-Rb通路在部分三阴性乳腺癌患者中被激活；如果得到证实，这些患者也可能受益于CDK4/6抑制剂的治疗。
研究结论
这项研究使用pRb作为CDK4/6活性指标，证明了HER2+会导致pRb水平显著升高，并且HER2基因拷贝数与pRb水平之间存在正相关。结果表明，HER2+使用CDK4/6抑制剂治疗时可能有所缓解，pRb可作为预测的生物标志物。
参考文献
1.Pernas S，Tolaney S M，Winer E P，et al.CDK4/6 inhibition in breast cancer:current practice and future directions[J].Therapeutic advances in medical oncology，2018，10:1758835918786451.
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3.Butt A J，McNeil C M，Musgrove E A，et al.Downstream targets of growth factor and oestrogen signalling and endocrine resistance:the potential roles of c-Myc，cyclin D1 and cyclin E[J].Endocrine Related Cancer，2005，12(1):S47.
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9.Goel S，Wang Q，Watt A C，et al.Overcoming therapeutic resistance in HER2-positive breast cancers with CDK4/6 inhibitors[J].Cancer cell，2016，29(3):255-269.
10.Condorelli R，Spring L，O’shaughnessy J，et al.Polyclonal RB1 mutations and acquired resistance to CDK 4/6 inhibitors in patients with metastatic breast cancer[J].Annals of Oncology，2018，29(3):640-645.
审批号：CN-115671
有效期至：2024-5-24
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